النشاف المناعي. الأساليب الحديثة في تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. الدراسة أثناء الحمل

ما هي اللطخة المناعية؟ هذه طريقة شائعة للتشخيص المعملي. عدوى فيروسيةشخص. تعتبر من أكثر الطرق دقة وموثوقية للكشف عن وجود فيروس نقص المناعة البشرية. من حيث موثوقيته ، فإنه يفوق حتى نتائج اللطخة المناعية التي تعتبر نهائية وغير قابلة للدحض.

معلومات عامة

اللطخة المناعية - ما هذا؟ من أجل التعرف على إصابة الشخص بفيروس نقص المناعة البشرية ، من الضروري الخضوع لاختبار معمل لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة. تقنية اللطخة الغربية تسمى أيضًا اللطخة الغربية. يتم استخدامه للكشف عن الالتهابات الفيروسية البشرية كطريقة خبراء إضافية. من الضروري تأكيد ELISA - اختبار معمل يسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم. أعد الفحص عن طريق التجلط المناعي تحليل ايجابيإليسا. يعتبر الأكثر حساسية وتعقيدًا وتكلفة.

غرض

ما هي الطعمه المناعيه؟ هذه تقنية للاختبار المعملي لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة للفيروس. أثناء الدراسة ، يقوم الأخصائي بفصل بروتينات الفيروس في الهلام بشكل مبدئي ونقلها إلى غشاء النيتروسليلوز. يهدف إجراء التجلط المناعي إلى تحديد فيروس نقص المناعة البشرية في مراحل مختلفة. في المرحلة الأولى ، يخضع الفيروس المنقى لرحلان كهربائي من الأجزاء المكونة له ، ويتم فصل المستضدات الموجودة في تركيبته بالوزن الجزيئي.

يتكاثر في خلية حية ، ويدمج المعلومات الجينية الخاصة به فيها. في هذه المرحلة ، يصبح الشخص حاملاً لفيروس نقص المناعة البشرية إذا كان مصابًا. خصوصية المرض هي أنه قد لا يظهر نفسه لفترة طويلة. يدمر الفيروس الخلايا الليمفاوية ، فتقل مناعة الإنسان ، ويصبح الجسم غير قادر على مقاومة العدوى. إذا تم علاج فيروس نقص المناعة البشرية بشكل صحيح وفي الوقت المناسب ، فسيعيش المريض في سن الشيخوخة. نقص العلاج سيؤدي حتما إلى الموت. من لحظة الإصابة ، ولكن بدون علاج ، لا يزيد الحد الأقصى للعمر عن عشر سنوات.

الخصائص

يعد تحليل اللطخة المناعية طريقة موثوقة تسمح لك بتحديد وجود الأجسام المضادة لمولدات المضادات فيروس نقص المناعة البشرية أولاوالنوع الثاني. إذا أصيب شخص ما ، تظهر الأجسام المضادة في غضون أسبوعين ، والتي يمكن اكتشافها في وقت لاحق. خصوصية فيروس نقص المناعة البشرية هو أن كمية الأجسام المضادة تزداد بسرعة وتبقى في دم المريض. حتى في حالة وجودها ، فقد لا يظهر المرض لمدة عامين أو أكثر. لا تحدد طريقة ELISA دائمًا بدقة وجود المرض ، لذلك ، يلزم تأكيد النتائج باستخدام التجلط المناعي و PCR إذا أظهر الإنزيم المناعي نتيجة ايجابية.

مؤشرات للتعيين

ما هي هذه "الطمرة المناعية" التي تم اكتشافها بالفعل ، ولكن لمن تم تكليف هذه الدراسة؟ تصبح نتيجة ELISA الإيجابية سببًا لاجتياز اختبارات طريقة التجلط المناعي. من الضروري الخضوع لفحص الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم للمرضى الذين سيخضعون للجراحة. بالإضافة إلى ذلك ، يجب إجراء تحليل للنساء اللواتي يخططن للحمل ، وكذلك لكل من يعيش حياة جنسية مختلطة. تعيين مناعي للمرضى المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية إذا كانت نتائج ELISA موضع شك. قد تصبح الأعراض المزعجة التالية سببًا للاتصال بالطبيب:

• فقدان الوزن الشديد
• ضعف وفقدان الأداء.
• اضطراب في حركة الأمعاء (الإسهال) يستمر لمدة ثلاثة أسابيع ؛
• جفاف الجسم.
• حمى؛
• تضخم الغدد الليمفاوية في الجسم.
• تطور داء المبيضات والسل والالتهاب الرئوي وداء المقوسات وتفاقم الهربس.

لا يحتاج المريض إلى الاستعداد قبل التبرع بالدم الوريدي. يجب عدم تناول الطعام قبل 8-10 ساعات من الدراسة. لا ينصح بشرب المشروبات الكحولية والقهوة قبل يوم من التبرع بالدم ، لممارسة التمارين البدنية الشاقة ، لتجربة القلق.

أين يتم التحليل؟

أين يمكنني إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية؟ ELISA ، يتم إجراء دراسات اللطخة المناعية في عيادات خاصة في المناطق الحضرية ، وتصدر النتائج في غضون يوم واحد. التشخيصات العاجلة ممكنة أيضًا. في المؤسسات الطبية الحكومية ، يتم إجراء اختبارات ELISA والتخمين المناعي مجانًا ، وفقًا لتشريعات الاتحاد الروسي. تخضع النساء الحوامل ، وكذلك المرضى الذين سيتم نقلهم إلى المستشفى أو الخضوع لعملية جراحية ، لاختبارات إلزامية للكشف عن الأمراض المعدية.

كيف يتم البحث؟

كيف يتم إجراء تحليل ELISA؟ تؤكد أو تدحض اللطخة المناعية الإيجابية / السلبية نتائج المقايسة المناعية للإنزيم. إجراء البحث بسيط للغاية. يقوم الأخصائي بأخذ عينات من الدم الوريدي ، في الوقت المناسب لا يستغرق أكثر من خمس دقائق. بعد أخذ العينات ، يجب تطهير موقع الحقن وختمه بالجص. يتم تنفيذ السياج على معدة فارغة ، لذلك بعد العملية لن يؤذي تناول قطعة من الشوكولاتة الداكنة أو شرب مشروب ساخن حلو.

من أجل الحصول على إحالة لإجراء تحليل مجاني في مؤسسة طبية عامة ، يجب عليك زيارة طبيب عام. بشكل عام ، لا تختلف اللطخة المناعية عن اختبارات الدم الأخرى من حيث طريقة أخذ العينات. تقنية البحث بسيطة. إذا كان في دم الإنسانيوجد فيروس ، يبدأ الجسم في إنتاج أجسام مضادة لتدميرها. لكل فيروس مجموعته الخاصة من بروتينات المستضد. إن الكشف عن هذه الأجسام المضادة هو أساس تقنية التجلط المناعي.

سعر

كم تكلفة التحليل؟ إن اللطخة المناعية لفيروس نقص المناعة البشرية ليست اختبارًا رخيصًا. في المتوسط ​​، يكلف فحص الفحص بواسطة طرق المقايسة المناعية من 500 إلى 900 روبل. Immunoblotting هي دراسة تحقق ، تتراوح تكلفتها من ثلاثة إلى خمسة آلاف روبل. الأساليب الأكثر تعقيدًا أغلى بكثير. على سبيل المثال ، سوف تحتاج إلى دفع حوالي 12000 روبل مقابل ذلك.

تفسير النتيجة

أكثر الطرق شيوعًا لتشخيص عدوى فيروس العوز المناعي البشري هي المقايسة المناعية الإنزيمية والطفحة المناعية. يتم استخدامها لتحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة في مصل الدم. عادة ما يتم تأكيد وجود العدوى من خلال اختبارين: الفحص والتأكيد. يجب أن يتم تفسير نتائج الدراسة من قبل الطبيب ، كما أنه يشخص ويصف العلاج. إذا كانت اللطخة المناعية موجبة ، فهذا يعني أن الفيروس موجود في جسم الإنسان.

لا ينبغي أن تكون النتيجة الإيجابية سببًا للعلاج الذاتي ، حيث قد يكون لكل مريض صورته الخاصة عن المرض. يشمل التحليل النوعي الفحص والتحقق. إذا لم يتم العثور على فيروس في المريض تكون النتيجة "سلبية". إذا تم الكشف عن طريق الفحص ، يتم إجراء دراسة تحقق إضافية. اللطخة المناعية هو تحليل يؤكد أو يدحض الفحص. إذا ظهرت بقع داكنة على شريط الاختبار في مناطق معينة (توطين البروتين) ، يتم تشخيص "فيروس نقص المناعة البشرية". إذا كانت النتائج موضع شك ، يتم إجراء الاختبارات في غضون ثلاثة أشهر.

يمكنك منع الإصابة بفيروس نقص المناعة إذا اتبعت قواعد معينة: تجنب الاتصال الجنسي العرضي ، واستخدام الواقي الذكري أثناء الاتصال ، وعدم تناول الأدوية. إذا تم الكشف عن المرض لدى المرأة الحامل ، فمن المهم اتباع توصيات الطبيب المعالج بدقة ، ولا تنسى أن يتم فحصك لوجود الفيروس.

انخفاض ضغط الدم العقلي ، عدم انتظام دقات القلب ، ضيق التنفس ، زرقة. مع مسار المرض الشديد ، من الممكن حدوث نزيف وقيء بمزيج من الدم. تضخم الكبد والطحال. لوحظ قلة البول. تظل درجة الحرارة مرتفعة باستمرار لمدة 3-10 أيام. في الدم المحيطي - زيادة عدد الكريات البيضاء العدلات مع تحول الصيغة إلى اليسار. بالإضافة إلى الموصوفة المظاهر الشائعةالطاعون ، تتطور الآفات المميزة للأشكال السريرية الفردية للمرض.

الشكل الجلدي نادر (3-5٪). في موقع بوابة دخول العدوى ، تظهر بقعة ، ثم حطاطة ، حويصلة (flikten) ، مليئة بمحتويات نزفية مصلية ، محاطة بمنطقة مخترقة مع احتقان ووذمة. تتميز Flickena بألم حاد. عندما يتم فتحه ، تتشكل القرحة بقشرة داكنة في الأسفل. تتميز قرحة الطاعون بمسار طويل ، يشفى ببطء ، ويشكل ندبة. إذا كان هذا الشكل معقدًا بسبب تسمم الدم ، تتطور البثور والقروح الثانوية. من الممكن تطوير بوبو إقليمي (شكل الجلد الدبلي).

يحدث الشكل الدبلي في أغلب الأحيان (حوالي 80 ٪) ويتميز بالود النسبي للدورة. منذ الأيام الأولى للمرض ، يظهر وجع حاد في منطقة الغدد الليمفاوية الإقليمية ، مما يجعل من الصعب تحريكها ويجبر المريض على اتخاذ وضعية قسرية. الدبل الأساسي ، كقاعدة عامة ، هو واحد ، ولا يتم ملاحظة الدبلات المتعددة في كثير من الأحيان. في معظم الحالات ، تتأثر الأربية والفخذ ، وغالبًا ما تتأثر الإبط وعنق الرحم الغدد الليمفاوية... تتراوح أحجام Bubo من الجوز إلى التفاح متوسط ​​الحجم. ملامح حية - وجع حاد ، وثبات كثيف ، والالتصاق بالأنسجة الأساسية ، وملامح ناعمة بسبب تطور التهاب محيط الغدد الصماء. يبدأ Bubo في التكون في اليوم الثاني من المرض. مع تطوره ، يتحول الجلد فوقه إلى اللون الأحمر ، ويضيء ، وغالبًا ما يكون له لون مزرق. في البداية يكون كثيفًا ، ثم يخفف ، ويظهر التذبذب ، وتصبح الخطوط غير واضحة. في اليوم العاشر إلى الثاني عشر من المرض ، يتم فتحه - يتشكل ناسور ، تقرح. مع مسار حميد للمرض والعلاج بالمضادات الحيوية الحديثة ، لوحظ ارتشافه أو تصلبه. نتيجة للانجراف الدموي للممرض ، يمكن أن تتشكل الدبلات الثانوية ، والتي تظهر لاحقًا وتكون صغيرة الحجم ، وأقل إيلامًا ، وكقاعدة عامة ، لا تتقيح. يمكن أن يكون من المضاعفات الهائلة لهذا الشكل تطوير شكل تعفن رئوي ثانوي ، مما يؤدي إلى تفاقم حالة المريض بشكل حاد ، إلى نتيجة مميتة.

الرئوي الأساسيشكل نادر ، خلال فترات الأوبئة في 5-10٪ من الحالات وهو أخطر من الناحية الوبائية والشكل السريري للمرض. يبدأ بشكل حاد وعنيف. على خلفية متلازمة التسمم الواضحة من الأيام الأولى ، يظهر سعال جاف وضيق شديد في التنفس وآلام في الصدر. ثم يصبح السعال منتجًا ، مع إنتاج البلغم ، الذي يمكن أن تتفاوت كميته من بضع بصاق إلى كميات كبيرة ، ونادرًا ما يكون غائبًا على الإطلاق. يكون البلغم في البداية زبدًا ، زجاجيًا ، شفافًا ، ثم يأخذ مظهرًا دمويًا ، ويصبح لاحقًا دمويًا بحتًا ، ويحتوي على عدد كبير من بكتيريا الطاعون. عادة ما يكون ذو قوام سائل - أحد علامات التشخيص... البيانات المادية شحيحة: تقصير طفيف في صوت الإيقاع فوق الفص المصاب ، مع التسمع لا توجد حشوات فقاعية دقيقة وفيرة ، والتي من الواضح أنها لا تتوافق مع الحالة الخطيرة العامة للمريض. تتميز الفترة النهائية بزيادة في ضيق التنفس والزرقة وتطور الذهول والوذمة الرئوية و TSS. ينخفض ​​ضغط الدم ، ويتسارع النبض ويصبح شبيهاً بالخيوط ، وتبدو أصوات القلب مكتومة ، ويتم استبدال ارتفاع الحرارة بانخفاض حرارة الجسم. في حالة عدم وجود علاج ، ينتهي المرض بالموت في غضون 2-6 أيام. مع الاستخدام المبكر للمضادات الحيوية ، يكون مسار المرض حميدًا ويختلف قليلاً

جهاز المناعة(لطخة غربية) - طريقة الاختبار المختبري لمصل الدم لوجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ؛ إنه أكثر دقة من ELISA ويستخدم لتأكيد نتائج ELISA. ELISA - مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) - البحث المعمليالسماح بتحديد وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم ؛ اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية.

وفقًا لتوصية منظمة الصحة العالمية ، يتم استخدام النشاف الغربي في تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية كطريقة خبيرة إضافية يجب أن تؤكد نتائج ELISA. عادةً ما تُستخدم هذه الطريقة للتحقق مرة أخرى من نتيجة إيجابية باستخدام ELISA ، نظرًا لأنها تعتبر أكثر حساسية وتحديدًا ، على الرغم من أنها أكثر تعقيدًا وتكلفة.

يجمع النشاف المناعي بين مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) والفصل الكهربي الأولي للبروتينات الفيروسية في مادة هلامية ونقلها إلى غشاء النيتروسليلوز. يتكون إجراء اللطخة المناعية من عدة مراحل (). أولاً ، يخضع فيروس نقص المناعة البشرية ، الذي سبق تنقيته وتحلله إلى مكوناته المكونة ، للرحلان الكهربائي ، بينما يتم فصل جميع المستضدات التي يتكون منها الفيروس عن طريق الوزن الجزيئي. يتم بعد ذلك مسح المستضدات من الجل على شريط مرشح نيتروسليلوز أو نايلون ، والذي يحتوي الآن على طيف من بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية غير المرئية للعين. بعد ذلك ، يتم تطبيق مادة الاختبار على الشريط (مصل الدم ، بلازما دم المريض ، وما إلى ذلك) ، وإذا كانت هناك أجسام مضادة محددة في العينة ، فإنها ترتبط بشرائط بروتينات المستضد المقابلة لها بدقة. نتيجة للتلاعب اللاحق (مثل ELISA) ، يتم تصور نتيجة هذا التفاعل - تصبح مرئية. يؤكد وجود العصابات في أجزاء معينة من الشريط وجود أجسام مضادة لمستضدات فيروس نقص المناعة البشرية المحددة بدقة في مصل الدم المدروس.

يستخدم النشاف المناعي بشكل شائع لتأكيد تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. تعتبر منظمة الصحة العالمية الأمصال الإيجابية التي يتم فيها الكشف عن الأجسام المضادة لأي بروتينين مغلفين لفيروس نقص المناعة البشرية عن طريق النشاف المناعي. وفقًا لهذه التوصيات ، إذا كان هناك تفاعل مع بروتين واحد فقط من بروتينات الغلاف (gp160 ، gp120 ، gp41) في تركيبة أو بدون تفاعل مع البروتينات الأخرى ، فإن النتيجة تعتبر مشكوك فيها ويوصى بإعادة الاختبار باستخدام مجموعة أخرى سلسلة أو شركة أخرى. إذا ظلت النتيجة مشكوك فيها حتى بعد ذلك ، يستمر البحث كل 3 أشهر.

لإجراء التنظير المناعي في المرحلة الأولى ، يتم فصل البروتينات الموجودة في مصل الدم في الهلام وفقًا لوزنها الجزيئي وشحنتها باستخدام مجال كهربائي (بطريقة الرحلان الكهربائي للهلام). ثم يتم وضع غشاء نيتروسليلوز أو نايلون على الجل و "مسحه" (هذا هو النشاف). يتم تنفيذ ذلك في غرفة خاصة تسمح بنقل المادة بشكل كامل من الجل إلى الغشاء. نتيجة لذلك ، يتم إعادة إنتاج نمط ترتيب البروتين الموجود على الجل على غشاء (لطخة) ، والذي يمكن معالجته بسهولة أكثر. في البداية ، يتم معالجة الغشاء بأجسام مضادة للمستضد المطلوب ، وبعد غسل المادة غير المربوطة ، تتم إضافة اتحاد مُصنَّف إشعاعيًا ، والذي يرتبط بشكل خاص بالأجسام المضادة (كما في ELISA). يتم تحديد موقع المركب المترافق الناتج عن الأجسام المضادة عن طريق التصوير الشعاعي الذاتي باستخدام فيلم الأشعة السينية. بعد ظهوره ، يتضح كل شيء ما إذا كان هناك مستضدات في الدم أم لا.

يسمح الطعم المناعي لفيروس نقص المناعة البشرية باكتشاف الأجسام المضادة للبروتينات الفيروسية الموضوعة على غشاء نيتروسليلوز خاص. هذه دراسة دقيقة للغاية تحدد وجود الكسور التي توجد فيها البروتينات الرئيسية في شكل نطاقات صغيرة.

يحتوي غلاف فيروس HIV-1 على بروتينات سكرية بوزن جزيئي يتراوح من 41 إلى 160 قرصًا مضغوطًا (كيلودالتون). قيمة كبيرة لعقد النشاف المناعييحتوي على بروتين سكري HIV-2 بوزن جزيئي يتراوح من 32 كيلو دالتون إلى 140 كيلو دالتون. يتم تمثيل بروتينات جوهر HIV-1 وإنزيمات الفيروس بواسطة البروتينات p17 ، p24 ، p55.

يتكون العامل المسبب لـ HIV-2 من بروتينات تم تحديدها كـ p16 ، p25 ، p56. يشكلون قوقعته الداخلية. يتضمن الجينوم 6 جينات تنظيمية و 3 جينات هيكلية. في كثير من الأحيان ، أثناء الانقسام الخلوي ، تنشأ أخطاء وراثية وتظهر عدة أنواع فرعية من الممرض.

عينات إيجابية

للقضاء على الأخطاء متى التشخيص المختبريبالنسبة لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية ، يتم وصف المريض بدراسة إضافية. يتم دمج نتائجها كإيجابية إذا تم الكشف عن الأجسام المضادة لبروتينات 2 أو 3 من HIV-1 أو HIV-2.

اللطخة المناعية تؤكد كل نتائج ELISA الجيدة. في هذه الحالة ، يتم اكتشاف الأجسام المضادة لـ gp120 / 160 أو gp41 أو p24 ، وهي وحدات هيكلية لجينات الإيدز الثلاثة الرئيسية - gag و pol و env. في بعض المرضى الذين يعانون من نتائج سلبية لـ ELISA و PCR ، تظهر اللطخة المناعية عدة نطاقات إيجابية. يصف الطبيب دراسة إضافية لـ p24 لإجراء التشخيص الصحيح واستبعاد المرحلة المبكرة من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

إذا كانت النتائج التي تم الحصول عليها موضع شك ، يُعرض على المريض إعادة الاختبار خلال الأشهر الثلاثة القادمة. يتم تأكيد جميع حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية تقريبًا باستخدام نظام الطعم المناعي ، جهاز Sanofi. في معظم الحالات ، يتم اكتشاف بروتينات مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية ، p25 و gp110 / 120 و gp160 ، مما يشير إلى الإصابة بالفيروس. يتم تسجيل اختبار إيجابي كاذب في المرضى الذين يعانون من أمراض النسيج الضام مستوى مرتفعالبيليروبين ، عند التفاعل مع مستضدات فيروسية مختلفة.

نتيجة سلبية

في حالة عدم وجود خطوط موجبة مقابلة لبروتينات فيروس الإيدز ، يتم فك الشفرة المناعية كنتيجة سلبية. يؤكد التحليل بشكل لا لبس فيه عدم وجود عدوى بفيروس نقص المناعة أو يشير إلى "فترة نافذة". إذا كانت اللطخة المناعية سلبية ، فإن الشخص ليس حاملًا لفيروس الإيدز.

يتم أخذ عينات مصل من مرضى مصابين بفيروس نقص المناعة البشرية للدراسة. يتم تخزينها مجمدة عند -20 درجة مئوية. يتم إجراء التحليل باستخدام أنظمة الاختبار:

• مولد المضاد؛
• المؤتلف فيروس نقص المناعة البشرية.
• بيبتوسكرين.

يشير تسجيل النتيجة السلبية إلى عدم وجود أجسام مضادة للبروتينات السكرية المغلفة بفيروس نقص المناعة البشرية gp120 ، gp160 ، Sp41 في المصل.

غالبًا ما يكون المريض مهتمًا بمسألة ما إذا كان يمكن أن يكون هناك اختبار طقطقة مناعية سلبي لفيروس نقص المناعة البشرية في مريض لديه شريك جنسي مصاب. بعد الدراسة ، غالبًا ما يتم الحصول على نتيجة مشكوك فيها أو يتم إصلاح الأجسام المضادة لبروتينات gp120 و gp160 ، مما يشير إلى الغياب التام للبيانات السلبية. في بعض الأحيان يتم تسجيل استجابة مشكوك فيها في المرضى الذين يعانون من عدوى بدون أعراض.

نتائج غير قابلة للتفسير

التحليل الذي يتم إجراؤه باستخدام الاختبارات المختلفة للأجسام المضادة لعدوى فيروس العوز المناعي البشري في بعض الأحيان لا يتوافق مع النتائج السلبية ولا يفي بمعايير الإيجابية المصلية. من الصعب على الطبيب تحديد سبب النتيجة المشكوك فيها.

بعض المرضى ليسوا معرضين لخطر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. قد يخطئ الطبيب في تفسير نتائج الاختبار إذا كانت العدوى ناتجة عن نمط مصلي مختلف.

يجب فحص مصل دم المريض بمرور الوقت. إذا لم يتم ملاحظتها لمدة 6 أشهر الاعراض المتلازمةالإيدز ولا توجد عوامل خطر ولا إصابة المريض بالعدوى.

يتم الحصول على نتائج اختبار مشكوك فيها في المرضى الذين يعانون من مخاطر منخفضة للإصابة بالعدوى. في بعض الحالات ، يحدث ظهور بيانات غير واضحة بسبب المركبات المناعية والأجسام المضادة الذاتية الموجودة في مصل الدم.

في بعض المرضى ، يحدث حدوث نتائج مشكوك فيها بسبب تطور العمليات المرضية:

• أمراض معدية؛
• ورم سرطاني
• رد فعل تحسسي.

المريض لديه تغييرات في التحليل السريري للدم ، يلاحظون النمو بروتين سي التفاعليأو زيادة ESR. في الناس الذين يعانون أمراض معدية، غالبًا ما تكشف عن استجابة لطخة مناعية مشكوك فيها لفيروس نقص المناعة البشرية.

لا يمكن للمرضى الذين يعانون من نتائج غير مؤكدة أن يكونوا متبرعين بالدم والمواد البيولوجية.

الطريقة الخطية

يشمل مبدأ التجلط المناعي ما يلي:

1. استخدام مادة فيروسية أصلية على شكل فيروس HIV أو مستضدات بتنسيق Western -Blot.
2. مزيج بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية مع الأجسام المضادة الفردية المكتشفة في مصل الدم.
3. تتم عملية الحضانة مع إضافة الأجسام المضادة Ig المضادة للإنسان.
4. فك المشارب الملونة.

يسمح التحليل للطبيب بتفسير نتائج الدراسة في الوقت المناسب. يتم فك شفرة لطخة موجبة على أنها 2ENV +/- GAG + / POL ، غير محددة - 1 ENV +/- GAG + / POL. النتيجة السلبية تفترض عدم وجود خطوط.

لإجراء التحليل ، يتم استخدام لطخة مناعية مؤتلفة ومتحللة. الدراسة محددة وتمثل 99.5٪.

يهتم المرضى بما إذا كانت نتيجة التحليل يمكن فك شفرتها على أنها خاطئة. يمكن تشكيل البيانات المستلمة كنتيجة للتحفيز قوى الحمايةالكائن الحي (الحمل ، غسيل الكلى). في حالة الاشتباه في الإصابة بمتلازمة الفيروسات القهقرية الحادة والاتصال بمريض مصاب بعدوى فيروس العوز المناعي البشري ، ينصح المريض بالتبرع بالمصل من أجل تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل. يتم تأكيد اختبار إعادة المصل عن طريق القياس العبئ او الحمل الفيروسيفي الصورة المعروضة للمواد البيولوجية.

تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية عند الأطفال حديثي الولادة

تحليل الإيدز عند الطفل عمر مبكريتم إجراؤها في حالة حدوث اتصال بأم مصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. يمكن أن تكون الاختبارات المصلية إيجابية في غضون 1.5 سنة. يتم الكشف عن الأجسام المضادة في مصل الدم لحديثي الولادة بواسطة ELISA و RIF والنشاف المناعي.

في غضون 9 أشهر من عمر الطفل ، تظهر نتيجة إيجابية بسبب وجود أجسام مضادة للأم في مصل الدم. تبلغ خصوصية مستضد p24 حوالي 65٪. في بعض الحالات ، لا يمكن اكتشاف الأجسام المضادة عند الطفل المريض إذا تم تشخيصه بمحتوى منخفض من الجلوبيولين في الدم. لا تضمن نتيجة الطعم المناعي السلبية المؤكدة عدم وجود عدوى.

يتم إجراء الاختبار على عدة مراحل:

• يوم أو يومين بعد الولادة ؛
• في 1-2 أشهر
• في سن ستة أشهر.

يتم إجراء مزيد من الدراسة للأجسام المضادة حتى يتم الحصول على نتيجتين سلبيتين من الجلطة المناعية. إجراء تشخيص لمرض الإيدز في الطفل المولود له امرأة مصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ربما بناءً على نتيجتين إيجابيتين من اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل. يُستبعد انتقال العامل الممرض لفيروس نقص المناعة البشرية إلى الوليد إذا كانت المرأة لا ترضع.

الدراسة أثناء الحمل

توصف الأم الحامل بالمناعة والنشاف الخطي إذا تم الحصول على نتيجة إيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية بواسطة ELISA. إذا تم تأكيد البقعة ، فإن المريض مصاب بالإيدز. في هذه الحالة ، بدءًا من الأسبوع الرابع عشر من الحمل ، يتم وصف العلاج لمنع إصابة الطفل.

يسأل المريض الطبيب المعالج ما إذا كان بإمكان اختصاصي ارتكاب خطأ عند إجراء اختبار مصل الدم أثناء الحمل. إنه ملزم بتسليم المرأة الحامل نسخًا من اختبارات PCR و ELISA لإزالة الشكوك حول موثوقيتها.

تظهر المشاكل في بعض الأحيان عند إجراء لطخة مناعية ، ولكن إذا كانت ELISA و blot و PCR إيجابية ، فإن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية يتم تأكيده أخيرًا. احتمالية الحصول على اختبار إيجابي كاذب أثناء الحمل مرتفعة. إذا كانت ELISA (+) ، و immunoblot (-) ، يُعرض على المرأة استعادة مصل الدم.

تظهر نتيجة الدراسة في بطاقة الصرف للحامل. لما لها من قيمة إيجابية ، يحظر على المرأة إطعام الطفل بعد الولادة حتى لا تصيب فيروس الإيدز. يتم التوصل إلى الاستنتاجات النهائية على أساس الدراسات المختبرية والسريرية والوبائية. فقط بعد فك شفرتها ، يتم تشخيص المريض بعدوى فيروس نقص المناعة البشرية.

في تواصل مع

السمات المميزة:

• تحتوي مجموعة الكواشف "MPBA - Blot - HIV-1، HIV-2" على البروتينات الفيروسية المحللة المنقاة لـ HIV 1 والببتيد - المستضد المحدد gp36 لـ HIV-2 ؛
• يوفر الكشف عن الأجسام المضادة لـ HIV-1 و HIV-1 Group O و HIV 2 على شريط واحد ؛
• إجراء بسيط لإعداد التحليلات وإجرائها ؛
• مراقبة الجودة الداخلية للتفاعل *
• السرعة القصوى للتحليل (3 ساعات) ؛
• حجم صغير من عينة الاختبار - 20 ميكرولتر ؛
• لا يتطلب معدات إضافية للبحث ؛
• جودة المجموعة مضمونة باستخدام المواد المرجعية الروسية والدولية **

* يتم ضمان مراقبة الجودة الداخلية من خلال وجود:

• شرائط التحكم الداخلية ، توفر التحكم في إضافة عينة مصل أو بلازما ؛
• السيطرة على المصل السلبي (K-) ؛
• التحكم في المصل الإيجابي (K +) ، مما يسمح بتحديد العصابات المكتشفة على الشريط ؛
• التحكم في المصل الإيجابي الضعيف (K + cl) ، والذي يوفر التحكم في حساسية مجموعة الكواشف.

**ضمان الجودة:

تم تحديد خصائص مجموعة الكواشف "MPBA-Blot-HIV-1 ، HIV-2" عن طريق اختبار عينات من عينة عشوائية من المتبرعين والمرضى الذين تم تشخيصهم. عدوى فيروس نقص المناعة البشرية، ولوحات التحويل المصلي التجارية ، والألواح القياسية ، والعينات ذات المكونات "التي يحتمل أن تتداخل مع الكشف".

لا تعطي مجموعة الكاشف نتائج إيجابية خاطئة في دراسة لوحة الأمصال القياسية التي لا تحتوي على أجسام مضادة لـ HIV 1،2 و HIV-1 مستضد ("Standard AT (-) HIV" ، رقم FSR 2007/00953 بتاريخ 25.10. 2007). الخصوصية 100٪.

تم تحديد خصوصية التشخيص من خلال فحص عينة عشوائية من 200 متبرع من مختلف مراكز الدم والعيادات مع عدم وجود عدوى HIV-1 و HIV-2 مؤكدة مسبقًا. كانت الخصوصية في دراسة عينة عشوائية من المتبرعين 100٪.

تم تحديد خصوصية مجموعة الكاشف من خلال فحص 250 عينة ، بما في ذلك عينات المصل أو البلازما التي تم الحصول عليها من النساء الحوامل ، والمرضى في المستشفى المصابين بالتهاب الكبد C و E ، والعينات التي تحتوي على مكونات "يحتمل أن تتدخل". عند استخدام مجموعة "MPBA-Blot-HIV-1 ، HIV-2" لهذه العينات ، لم يتم العثور على نتائج إيجابية خاطئة.

تم تحديد الحساسية التشخيصية باستخدام:
- عينات بلازما مأخوذة من لوحة Boston Biomedica، Inc HIV-1 (WWRB 301) من مناطق مختلفة ، تحتوي على أنواع فرعية مختلفة من HIV-1: المجموعة M (الأنواع الفرعية A ، B ، C ، D ، E ، F) ، والمجموعة O ؛ كانت حساسية مجموعة الكاشف 100٪ ؛

تم تحديد حساسية مجموعة الكاشف في دراسة لوحات الانقلاب المصلي الدولية Boston Biomedica ، Inc (SeraCare Life Sciences) ، القط. nrs. PRB 903، PRB 904، PRB 909، PRB 912، PRB 916، PRB 917، PRB 918، PRB 919، PRB 921، PRB 923، PRB 924، PRB 927، PRB 928، PRB 932، PRB 940.

تكتشف مجموعة الكاشف الأجسام المضادة لـ HIV-1 في مصل لوحة قياسية تحتوي على أجسام مضادة لـ HIV-1 ("معيار AT (+) HIV-1" ، رقم FSR 2007/00953 بتاريخ 25.10.2007) ، ويكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية -2 في مصل لوح معياري يحتوي على أجسام مضادة لـ HIV-2 ("Standard AT (+) HIV-2" ، رقم FSR 2007/00953 من 25.10.2007). الحساسية - 100٪.

شهادة التسجيل رقم FSR 2010/07958 بتاريخ 13 يوليو 2011 (الصلاحية ليست محدودة)

تكوين:

• ماص مناعي. شرائط من غشاء النيتروسليلوز الأبيض مع بروتينات HIV-1 الفردية (gp160 ، gp120 ، p66 ، p55 ، p51 ، gp41 ، p31 ، p24 ، p17) يتم امتصاصها عليها بطريقة النقل الكهربائي ويتم وضعها على الشريط باستخدام ببتيد HIV-2 الاصطناعي ، نظير بروتين gp36 و IgG المضاد للإنسان (تحكم داخلي) - 18 قطعة ؛
• ك- السيطرة على المصل السلبي. مصل دم الإنسان ، الذي لا يحتوي على أجسام مضادة لـ HIV-1،2 ، HCV ، مستضد فيروس نقص المناعة البشرية ، HBsAg ، يتم تعطيله عن طريق التسخين عند 560 درجة مئوية ؛ سائل أصفر فاتح صافٍ - أنبوب واحد (0.08 مل). يحتوي على مواد حافظة: ثيميروسال وأزيد الصوديوم ؛
• K + - السيطرة على المصل الإيجابي. مصل دم بشري يحتوي على أجسام مضادة لـ HIV-1،2 (عيار لا يقل عن 1: 10000) ، لا يحتوي على HBsAg ، مستضد فيروس نقص المناعة البشرية ، أجسام مضادة لـ HCV ، معطل بالتسخين عند 560 درجة مئوية ؛ سائل أصفر فاتح صافٍ - أنبوب واحد (0.08 مل) يحتوي على مواد حافظة: ثيميروسال وأزيد الصوديوم ؛
• K + sl - مصل التحكم الإيجابي الضعيف. مصل دم بشري يحتوي على أجسام مضادة لـ HIV-1،2 (عيار لا يزيد عن 1: 200) ، خالي من HBsAg ، مستضد فيروس نقص المناعة البشرية ، أجسام مضادة لـ HCV ، معطل بالتسخين عند 560 درجة مئوية ؛ سائل أصفر فاتح - أنبوب واحد (0.08 مل). يحتوي على مواد حافظة: ثيميروسال وأزيد الصوديوم ؛
• RROKk (x10) - محلول تخفيف للعينات والمترافق. التركيز - عازلة تريس تحتوي على مصل الماعز الطبيعي المعالج مسبقًا ؛ سائل رمادي معتم - 1 زجاجة (10 مل). يحتوي على مادة حافظة: ثيميروسال.
• PRk (x20) - محلول التنظيف. التركيز - تريس عازلة تحتوي على توين -20 ؛ سائل عديم اللون شفاف - 1 زجاجة (70 مل). يحتوي على مادة حافظة: ثيميروسال.
• المترافقة. الأجسام المضادة IgG المضادة للإنسان من الماعز مترافقة مع الفوسفاتيز القلوي ؛ سائل واضح عديم اللون - أنبوب واحد (0.06 مل) ؛
• الركيزة (محلول التلوين). محلول من 5-برومو-4-فلورو-إندوليل فوسفات (BCIP) و nitro blue tetrazolium (NBT) ؛ سائل أصفر فاتح - 1 زجاجة (50 مل) ؛
• مسحوق النشاف المناعي. مسحوق الحليب منزوع الدسم - مسحوق أبيض غير متبلور أو أصفر فاتح - 5 عبوات × 1 جم ؛
• صفيحة بغطاء لإعداد رد فعل - قطعتان ؛
• ملاقط بلاستيكية - قطعة واحدة.