Immunità. Metodi moderni per la diagnosi dell'infezione da HIV. Studio durante la gravidanza

Che cos'è l'immunoblot? Questo è un metodo comune di diagnostica di laboratorio. infezione virale persona. È considerato uno dei modi più precisi e affidabili per rilevare la presenza dell'HIV. In termini di affidabilità, supera anche i risultati dell'immunoblot considerati inconfutabili e definitivi.

Informazione Generale

Immunoblot - che cos'è? Per riconoscere l'infezione da HIV in una persona, è necessario sottoporsi a un test di laboratorio del siero del sangue per la presenza di anticorpi. La tecnica Western blot è anche chiamata Western blot. Viene utilizzato per rilevare le infezioni virali umane come metodo esperto aggiuntivo. È necessario confermare l'ELISA, un test di laboratorio che consente di determinare la presenza di anticorpi HIV nel sangue. Ricontrollare con immunoblotting analisi positiva ELISA. È considerato il più sensibile, complesso e costoso.

Scopo

Che cos'è l'immunoblot? Questa è una tecnica per i test di laboratorio del siero del sangue per la presenza di anticorpi contro il virus. Durante lo studio, lo specialista separa preliminarmente le proteine ​​del virus nel gel e le trasferisce alla membrana di nitrocellulosa. La procedura di immunoblotting ha lo scopo di determinare l'HIV in diverse fasi. Nella prima fase, il virus purificato viene sottoposto a elettroforesi dalle sue parti costitutive e gli antigeni inclusi nella sua composizione vengono separati per peso molecolare.

Si moltiplica in una cellula vivente, incorporando in essa le proprie informazioni genetiche. In questa fase, una persona diventa portatrice del virus HIV se è stata infettata. La specificità della malattia è che potrebbe non manifestarsi per molto tempo. Il virus distrugge i linfociti, quindi l'immunità di una persona diminuisce e il corpo diventa incapace di resistere alle infezioni. Se l'HIV viene trattato correttamente e in tempo, il paziente vivrà fino a tarda età. La mancanza di terapia porterà inevitabilmente alla morte. Dal momento dell'infezione, ma senza trattamento, la durata massima della vita non supera i dieci anni.

Peculiarità

L'analisi immunoblot è un metodo affidabile che consente di determinare la presenza di anticorpi contro gli antigeni L'HIV prima di tutto e il secondo tipo. Se una persona è infetta, gli anticorpi compaiono entro due settimane, che possono essere rilevati molto più tardi. La particolarità dell'HIV è che il numero di anticorpi aumenta rapidamente e rimane nel sangue del paziente. Anche se sono presenti, la malattia potrebbe non manifestarsi per due o più anni. Il metodo ELISA non determina sempre con precisione la presenza della malattia, pertanto è necessaria la conferma dei risultati mediante immunoblotting e PCR se il test immunoenzimatico ha mostrato risultato positivo.

Indicazioni per appuntamento

Che cos'è questo "immunoblot" è già stato scoperto, ma a chi è assegnato questo studio? Un risultato ELISA positivo diventa il motivo per superare i test per il metodo di immunoblotting. È necessario eseguire un test di immunoassorbimento enzimatico per i pazienti che verranno operati. Inoltre, dovrebbe essere fatta un'analisi per le donne che pianificano una gravidanza, così come per tutti coloro che conducono una vita sessuale promiscua. Assegnare l'immunoblotting ai pazienti con HIV se i risultati ELISA sono in dubbio. I seguenti sintomi allarmanti possono diventare un motivo per contattare un medico:

• drastica perdita di peso;
• debolezza, perdita di prestazioni;
• un movimento intestinale disturbato (diarrea) che dura per tre settimane;
• disidratazione del corpo;
• febbre;
• linfonodi ingrossati sul corpo;
• sviluppo di candidosi, tubercolosi, polmonite, toxoplasmosi, esacerbazione dell'herpes.

Il paziente non ha bisogno di prepararsi prima di donare il sangue venoso. Il cibo non deve essere assunto 8-10 ore prima dello studio. Non è consigliabile bere bevande alcoliche e caffè il giorno prima della donazione di sangue, impegnarsi in esercizi fisici pesanti, provare ansia.

Dove fare l'analisi?

Dove posso fare il test per l'HIV? Gli studi ELISA, immunoblot vengono effettuati in cliniche private urbane, i risultati vengono rilasciati entro un giorno. Sono possibili anche diagnosi urgenti. Nelle istituzioni mediche statali, i test ELISA e l'immunoblotting vengono eseguiti gratuitamente, in conformità con la legislazione della Federazione Russa. Le donne in gravidanza, così come i pazienti che stanno per essere ricoverati o sottoposti a intervento chirurgico, sono sottoposti a test obbligatori per le malattie infettive.

Come si svolge la ricerca?

Come viene eseguita l'analisi ELISA? Immunoblot positivo/negativo conferma o confuta i risultati del test immunoenzimatico. La procedura di ricerca è abbastanza semplice. Lo specialista esegue un prelievo di sangue venoso, nel tempo non impiega più di cinque minuti. Dopo il campionamento, il sito di iniezione deve essere disinfettato e sigillato con un cerotto. La recinzione viene eseguita a stomaco vuoto, quindi dopo la procedura non farà male mangiare una tavoletta di cioccolato fondente o bere una bevanda calda dolce.

Per ottenere un rinvio per un'analisi gratuita in un istituto medico pubblico, è necessario visitare un medico di famiglia. In generale, l'immunoblot non differisce da altri esami del sangue in termini di metodo di campionamento. La tecnica di ricerca è semplice. Se in sangue umanoè presente un virus, il corpo inizia a produrre anticorpi per distruggerlo. Ogni virus ha il proprio set di proteine ​​antigene. La rilevazione di questi anticorpi è alla base della tecnica di immunoblotting.

Prezzo

Quanto costa l'analisi? Immunoblot per l'HIV non è un test economico. In media, un esame di screening con metodi di dosaggio immunologico costa da 500 a 900 rubli. L'immunoblotting è uno studio di verifica, il cui costo varia da tre a cinquemila rubli. I metodi più complessi sono molto più costosi. Ad esempio, dovrai pagare circa 12.000 rubli per questo.

Interpretazione del risultato

I metodi più comuni per diagnosticare l'infezione da HIV sono il dosaggio immunoenzimatico e l'immunoblot. Sono usati per determinare gli anticorpi contro il virus dell'immunodeficienza nel siero del sangue. La presenza dell'infezione è solitamente confermata da due test: screening e conferma. L'interpretazione dei risultati dello studio dovrebbe essere effettuata da un medico, che diagnostica e prescrive anche un trattamento. Se l'immunoblot è positivo, significa che un virus è presente nel corpo umano.

Un risultato positivo non dovrebbe essere un motivo per l'autotrattamento, poiché ogni paziente può avere un'immagine diversa della malattia. L'analisi qualitativa include lo screening e la verifica. Se non viene rilevato alcun virus nel paziente, il risultato è "negativo". Se rilevato mediante screening, viene effettuato un ulteriore studio di verifica. Immunoblot è un'analisi che conferma o confuta lo screening. Se sulla striscia reattiva compare un'oscuramento in determinate aree (localizzazione delle proteine), viene fatta una diagnosi di HIV. Se i risultati sono dubbi, i test vengono eseguiti entro tre mesi.

È possibile prevenire l'infezione da virus dell'immunodeficienza se si seguono alcune regole: evitare rapporti sessuali occasionali, utilizzare il preservativo durante il contatto, non assumere droghe. Se la malattia viene rilevata in una donna incinta, è importante seguire rigorosamente le raccomandazioni del medico curante, non dimenticare di essere esaminato per la presenza del virus.

ipotensione mentale, tachicardia, mancanza di respiro, cianosi. Con un decorso grave della malattia, sono possibili sanguinamento, vomito con una miscela di sangue. Il fegato e la milza sono ingranditi. Si nota l'Oliguria. La temperatura rimane costantemente alta per 3-10 giorni. Nel sangue periferico - leucocitosi neutrofila con uno spostamento della formula a sinistra. Oltre a quanto descritto manifestazioni comuni peste, sviluppano lesioni caratteristiche delle singole forme cliniche della malattia.

La forma cutanea è rara (3-5%). Nel sito del cancello d'ingresso dell'infezione, appare una macchia, quindi una papula, una vescicola (flikten), piena di contenuto emorragico sieroso, circondata da una zona infiltrata con iperemia ed edema. Flictena si distingue per un forte dolore. Quando viene aperto, si forma un'ulcera con una crosta scura sul fondo. L'ulcera della peste è caratterizzata da un lungo decorso, guarisce lentamente, formando una cicatrice. Se questa forma è complicata dalla setticemia, si sviluppano pustole e ulcere secondarie. È possibile lo sviluppo di un bubbone regionale (forma bubbonica della pelle).

La forma bubbonica si verifica più spesso (circa l'80%) e si distingue per la relativa benignità del decorso. Fin dai primi giorni della malattia, appare un forte dolore nella regione dei linfonodi regionali, che rende difficile il movimento e costringe il paziente a prendere una posizione forzata. Il bubbone primario, di regola, è singolo, i bubboni multipli si osservano meno spesso. Nella maggior parte dei casi, sono interessati l'inguine e il femorale, un po' meno spesso l'ascellare e il collo dell'utero I linfonodi... Le dimensioni di Bubo vanno dalla noce alla mela di medie dimensioni. Caratteristiche vivide: dolore acuto, consistenza densa, adesione con i tessuti sottostanti, contorni lisci dovuti allo sviluppo della periadenite. Bubo inizia a formarsi il secondo giorno di malattia. Man mano che si sviluppa, la pelle sopra di essa diventa rossa, brilla e spesso ha una tonalità cianotica. All'inizio è denso, poi si ammorbidisce, appare la fluttuazione, i contorni diventano indistinti. Il 10-12 ° giorno di malattia, viene aperto: si forma una fistola, si forma un'ulcerazione. Con un decorso benigno della malattia e la moderna terapia antibiotica, si osserva il suo riassorbimento o indurimento. Come risultato della deriva ematogena dell'agente patogeno, possono formarsi bubboni secondari, che compaiono più tardi e sono di piccole dimensioni, meno dolorosi e, di regola, non suppurano. Una formidabile complicazione di questa forma può essere lo sviluppo di una forma polmonare secondaria o settica secondaria, che peggiora bruscamente le condizioni del paziente, inclusa la morte.

polmonare primario la forma è rara, durante i periodi di epidemia nel 5-10% dei casi e rappresenta la forma clinica della malattia più pericolosa dal punto di vista epidemiologico e grave. Comincia bruscamente, violentemente. Sullo sfondo di una pronunciata sindrome da intossicazione fin dai primi giorni, compaiono tosse secca, grave mancanza di respiro, dolori lancinanti al petto. La tosse poi diventa produttiva, con la produzione di catarro, la cui quantità può variare da pochi sputi a quantità enormi, raramente è del tutto assente. Il catarro, dapprima schiumoso, vitreo, trasparente, poi assume un aspetto sanguinante, in seguito diventa puramente sanguinolento, contiene un numero enorme di batteri della peste. Di solito è di consistenza liquida - uno dei segni diagnostici... I dati fisici sono scarsi: un leggero accorciamento del suono della percussione sul lobo interessato, all'auscultazione non sono presenti abbondanti rantoli fini e gorgoglianti, che chiaramente non corrispondono alle condizioni generali gravi del paziente. Il periodo terminale è caratterizzato da un aumento della mancanza di respiro, cianosi, sviluppo di stupore, edema polmonare e TSS. La pressione sanguigna diminuisce, il polso si accelera e diventa filiforme, i suoni cardiaci sono attutiti, l'ipertermia viene sostituita dall'ipotermia. In assenza di trattamento, la malattia termina con la morte entro 2-6 giorni. Con l'uso precoce di antibiotici, il decorso della malattia è benigno, leggermente diverso

IMMUNOBLOT(western blot) - un metodo di analisi di laboratorio del siero del sangue per la presenza di anticorpi contro l'HIV; è più accurato di ELISA e viene utilizzato per confermare i risultati ELISA. ELISA - saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) -ricerca di laboratorio permettendo di determinare la presenza di anticorpi HIV nel sangue; Test degli anticorpi dell'HIV.

Secondo la raccomandazione dell'OMS, il Western blot viene utilizzato nella diagnosi dell'infezione da HIV come metodo esperto aggiuntivo che deve confermare i risultati ELISA. Di solito, questo metodo viene utilizzato per ricontrollare un risultato positivo con ELISA, poiché è considerato più sensibile e specifico, sebbene più complicato e costoso.

L'immune blotting combina il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) con la separazione elettroforetica preliminare delle proteine ​​virali in un gel e il loro trasferimento su una membrana di nitrocellulosa. La procedura di immunoblot consiste in diverse fasi (). Innanzitutto, l'HIV, precedentemente purificato e degradato nei suoi componenti costitutivi, viene sottoposto ad elettroforesi, mentre tutti gli antigeni che compongono il virus vengono separati per peso molecolare. Gli antigeni vengono quindi asciugati dal gel su una striscia filtrante di nitrocellulosa o nylon, che ora contiene uno spettro di proteine ​​HIV invisibile all'occhio. Successivamente, il materiale di prova viene applicato alla striscia (siero, plasma sanguigno del paziente, ecc.) E se il campione contiene anticorpi specifici, si legano alle strisce di proteine ​​​​dell'antigene che corrispondono strettamente a loro. Come risultato di successive manipolazioni (come ELISA), il risultato di questa interazione viene visualizzato - diventa visibile. La presenza di bande in alcune parti della striscia conferma la presenza di anticorpi contro antigeni HIV rigorosamente definiti nel siero studiato.

L'immunoblotting è più comunemente usato per confermare la diagnosi di infezione da HIV. L'OMS considera positivi i sieri in cui gli anticorpi contro due qualsiasi proteine ​​dell'involucro dell'HIV vengono rilevati mediante immunoblotting. Secondo queste raccomandazioni, se si verifica una reazione con una sola delle proteine ​​dell'involucro (gp160, gp120, gp41) in combinazione o senza una reazione con altre proteine, il risultato è considerato dubbio e si consiglia di ripetere il test utilizzando un kit di un altro serie o di un'altra società. Se anche dopo questo il risultato rimane dubbio, la ricerca viene continuata ogni 3 mesi.

Per eseguire l'immunoblotting nella prima fase, le proteine ​​contenute nel siero del sangue vengono separate nel gel in base al loro peso molecolare e caricate utilizzando un campo elettrico (mediante il metodo dell'elettroforesi su gel). Quindi una membrana di nitrocellulosa o nylon viene applicata al gel e "cancellata" (questo è blotting). Questa viene effettuata in un'apposita camera, che permette il completo trasferimento del materiale dal gel alla membrana. Di conseguenza, il modello di disposizione proteica che era sul gel viene riprodotto su una membrana (macchia), che può essere facilmente manipolata ulteriormente. Inizialmente, la membrana viene trattata con anticorpi contro l'antigene desiderato e, dopo aver lavato il materiale non legato, viene aggiunto un coniugato marcato radioattivamente, che si lega specificamente agli anticorpi (come in ELISA). La posizione del complesso coniugato marcato antigene-anticorpo risultante è determinata mediante autoradiografia utilizzando una pellicola a raggi X. Dopo la sua manifestazione, tutto diventa chiaro se ci sono antigeni nel sangue o meno.

Immunoblot per l'HIV consente di rilevare gli anticorpi contro le proteine ​​virali posizionate su una speciale membrana di nitrocellulosa. Si tratta di uno studio molto accurato che determina la presenza di frazioni in cui si trovano le principali proteine ​​sotto forma di piccole bande.

L'involucro del virus HIV-1 contiene glicoproteine ​​con un peso molecolare compreso tra 41 cd e 160 cd (kilodalton). Ottimo rapporto qualità-prezzo immunoblotting ha la glicoproteina HIV-2 con un peso molecolare da 32 kd a 140 kd. Le proteine ​​del nucleo dell'HIV-1 e gli enzimi del virus sono rappresentate dalle proteine ​​p17, p24, p55.

L'agente eziologico dell'HIV-2 è costituito da proteine ​​designate come p16, p25, p56. Formano il suo guscio interno. Il genoma comprende 6 geni regolatori e 3 geni strutturali. Spesso, durante la divisione cellulare, sorgono imprecisioni genetiche e compaiono diversi sottotipi dell'agente patogeno.

Campioni positivi

Per eliminare gli errori quando diagnostica di laboratorio Per l'infezione da HIV, al paziente viene prescritto uno studio aggiuntivo. I suoi risultati vengono integrati come positivi se vengono rilevati anticorpi contro 2 o 3 proteine ​​dell'HIV-1 o dell'HIV-2.

Immunoblot conferma tutti i buoni risultati ELISA. In questo caso vengono rilevati anticorpi contro gp120 / 160, gp41 o p24, che sono unità strutturali dei tre principali geni dell'AIDS: gag, pol e env. In alcuni pazienti con risultati ELISA e PCR negativi, l'immunoblot mostra diverse bande positive. Il medico prescrive un ulteriore studio p24 per fare la diagnosi corretta ed escludere la fase iniziale dell'infezione da HIV.

Se i risultati ottenuti sono in dubbio, al paziente viene offerto di ripetere il test entro i prossimi 3 mesi. Quasi tutti i casi di HIV vengono confermati utilizzando il sistema immunoblot, il dispositivo Sanofi. Nella maggior parte dei casi, vengono rilevati antigeni dell'HIV, proteine ​​p25, gp110 / 120 e gp160, che indicano l'infezione con il virus. Viene registrato un test falso positivo in pazienti affetti da malattie del tessuto connettivo con livello elevato bilirubina, quando interagisce con vari antigeni virali.

Risultato negativo

In caso di mancanza di linee positive corrispondenti alle proteine ​​del virus dell'AIDS, l'immunoblot viene decodificato come risultato negativo. L'analisi conferma inequivocabilmente l'assenza di infezione da virus dell'immunodeficienza o indica un "periodo finestra". Se l'immunoblot è negativo, la persona non è portatrice del virus dell'AIDS.

Per lo studio vengono prelevati campioni di siero da pazienti con infezione da HIV. Si conservano congelati a -20°C. L'analisi viene eseguita utilizzando sistemi di test:

• Antigene;
• HIV ricombinante;
• PeptoScreen.

La registrazione di un risultato negativo indica l'assenza di anticorpi contro le glicoproteine ​​dell'involucro dell'HIV gp120, gp160, Sp41 nel siero.

Spesso, il paziente è interessato alla domanda se possa esserci un test immunoblot negativo per l'HIV in un paziente che ha un partner sessuale infetto. Dopo lo studio, si ottiene spesso un risultato discutibile o si fissano anticorpi contro le proteine ​​gp120 e gp160, il che indica la completa assenza di dati negativi. A volte viene registrata una risposta dubbia in pazienti con infezione asintomatica.

Risultati non interpretabili

L'analisi eseguita utilizzando vari test per gli anticorpi contro l'infezione da HIV a volte non corrisponde a risultati negativi e non soddisfa i criteri di sieropositività. È difficile per un medico stabilire la causa di un risultato dubbio.

Alcuni pazienti non sono a rischio di infezione da HIV. Il medico può sbagliare nell'interpretare i risultati del test se l'infezione è causata da un sierotipo diverso.

Il siero del sangue del paziente deve essere esaminato nel tempo. Se non osservato per 6 mesi manifestazioni cliniche AIDS e non ci sono fattori di rischio, il paziente non ha infezioni.

Risultati dei test discutibili si ottengono in pazienti a basso rischio di infezione. In alcuni casi, la comparsa di dati poco chiari è causata dai complessi immunitari e dagli autoanticorpi contenuti nel siero sanguigno.

In alcuni pazienti, il verificarsi di risultati dubbi è causato dallo sviluppo di processi patologici:

• malattie infettive;
• tumore canceroso;
• reazione allergica.

Il paziente sviluppa cambiamenti nell'analisi clinica del sangue, osserva la crescita proteina C-reattiva o aumento della VES. Nelle persone che soffrono malattie infettive, spesso rivelano una dubbia risposta immunitaria all'HIV.

I pazienti con risultati incerti non possono essere donatori di sangue e materiali biologici.

Metodo lineare

Il principio dell'immunoblotting include:

1. Uso di sostanza virale nativa in formato HIV o antigeni in formato Western-Blot.
2. La combinazione delle proteine ​​dell'HIV con i singoli anticorpi rilevati nel siero del sangue.
3. Il processo di incubazione avviene con l'aggiunta di anticorpi anti-Ig umane marcati.
4. Decodifica delle strisce colorate.

L'analisi consente al medico di interpretare i risultati dello studio in modo tempestivo. Un blot positivo viene decodificato come 2ENV +/- GAG + / POL, non definito - 1 ENV +/- GAG + / POL. Un risultato negativo non presuppone striature.

Per eseguire l'analisi, vengono utilizzati immunoblot ricombinante e lisato. Lo studio è specifico ed è del 99,5%.

I pazienti sono interessati a sapere se il risultato dell'analisi può essere decodificato come falso. I dati ricevuti possono essere formati a seguito di stimolazione forze protettive organismo (gravidanza, emodialisi). Se si sospetta una sindrome retrovirale acuta e si entra in contatto con un paziente con infezione da HIV, si raccomanda al paziente di donare il siero per una reazione PCR. Il test re-sierologico è confermato dalla misurazione carica virale nell'immagine presentata di materiale biologico.

Diagnosi di HIV nei neonati

Analisi per l'AIDS in un bambino tenera età effettuata nel caso in cui si stabilisca un contatto con una madre sieropositiva. I test sierologici possono essere positivi entro 1,5 anni. Gli anticorpi nel siero del sangue di un neonato vengono rilevati mediante ELISA, RIF e immunoblotting.

Entro 9 mesi dalla vita di un bambino, appare un risultato positivo dovuto alla presenza di anticorpi materni nel siero del sangue. L'antigene p24 ha una specificità di circa il 65%. In alcuni casi, non è possibile rilevare gli anticorpi in un bambino malato se gli viene diagnosticato un basso contenuto congenito di globuline nel sangue. Un risultato immunoblot negativo accertato non garantisce l'assenza di infezione.

Il test viene eseguito in più fasi:

• 1-2 giorni dopo la nascita;
• tra 1-2 mesi;
• all'età di sei mesi.

Ulteriori studi sugli anticorpi vengono effettuati fino a quando non si ottengono 2 risultati negativi di immunoblot. Stabilire una diagnosi di AIDS in un bambino nato a donna infetta da HIV, possibilmente sulla base di 2 risultati positivi del test PCR. La trasmissione dell'agente patogeno dell'HIV al neonato è esclusa se la donna non allatta.

Studio durante la gravidanza

Alla futura mamma vengono prescritti immuno e linear blotting se si ottiene un risultato positivo per l'HIV da ELISA. Se la macchia è confermata, il paziente ha l'AIDS. In questo caso, a partire dalla 14a settimana di gravidanza, viene prescritta una terapia per prevenire l'infezione del bambino.

Se uno specialista può commettere un errore durante l'esecuzione di un esame del siero del sangue durante la gravidanza, il paziente chiede al medico curante. È obbligato a consegnare a una donna incinta copie dei test PCR ed ELISA per eliminare i dubbi sulla loro affidabilità.

A volte sorgono problemi durante l'esecuzione di un immunoblot, ma se ELISA, blot e PCR sono positivi, la diagnosi di infezione da HIV è finalmente confermata. La probabilità di ottenere un test falso positivo durante la gravidanza è alta. Se ELISA (+) e immunoblot (-), alla donna viene offerto di riprendere il siero del sangue.

Il risultato dello studio è indicato nella carta di scambio della donna incinta. Con il suo valore positivo, a una donna è vietato nutrire un bambino dopo il parto, in modo da non infettare il virus dell'AIDS. Le conclusioni finali sono tratte sulla base di studi di laboratorio, clinici ed epidemiologici. Solo dopo che sono stati decifrati, al paziente viene diagnosticata l'infezione da HIV.

In contatto con

Caratteristiche distintive:

• Il set di reagenti "MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2" contiene proteine ​​virali lisate purificate dell'HIV 1 e peptide - antigene determinato gp36 dell'HIV-2;
• Fornisce la rilevazione di anticorpi contro HIV-1, HIV-1 gruppo O, HIV 2 su una striscia;
• Procedura semplice per preparare e condurre analisi;
• Controllo qualità interno della reazione *
• Velocità massima di analisi (3 ore);
• Un piccolo volume del campione di prova - 20 μl;
• Non richiede attrezzature aggiuntive per la ricerca;
• La qualità del kit è garantita dall'utilizzo di materiali di riferimento russi e internazionali**

* Il controllo qualità interno è assicurato dalla presenza di:

• strisce di controllo interne, fornisce il controllo dell'aggiunta di un campione di siero o plasma;
• siero di controllo negativo (K-);
• siero di controllo positivo (K+), che consente di identificare le bande rilevate sulla striscia;
• controllo siero debolmente positivo (K + cl), che fornisce il controllo della sensibilità del set di reagenti.

**Garanzia di qualità:

Le caratteristiche del set di reagenti "MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2" sono state determinate testando campioni di un campione casuale di donatori, pazienti con diagnosi infezione da HIV, pannelli di sieroconversione commerciale, pannelli standard e campioni con componenti di "rilevazione potenzialmente interferente".

Il kit di reagenti non fornisce risultati falsi positivi nello studio di sieri pannello standard che non contengono anticorpi contro l'HIV 1,2 e l'antigene HIV-1 ("Standard AT (-) HIV", n. FSR 2007/00953 del 25.10. 2007). La specificità è del 100%.

La specificità diagnostica è stata determinata esaminando un campione casuale di 200 donatori provenienti da vari centri trasfusionali e cliniche con assenza precedentemente confermata di HIV-1, infezione da HIV-2. La specificità nello studio di un campione casuale di donatori è stata del 100%;

La specificità del kit di reagenti è stata determinata testando 250 campioni, inclusi campioni di siero o plasma ottenuti da donne in gravidanza, pazienti ospedalizzati con epatite C ed E e campioni con componenti "potenzialmente interferenti". Quando si utilizza il set "MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2" per questi campioni, non sono stati trovati risultati falsi positivi.

La sensibilità diagnostica è stata determinata utilizzando:
- campioni di plasma del pannello HIV-1 (WWRB 301) di Boston Biomedica, Inc provenienti da diverse regioni, contenenti diversi sottotipi di HIV-1: gruppo M (sottotipi A, B, C, D, E, F) e gruppo O; la sensibilità del kit di reagenti era del 100%;

La sensibilità del kit di reagenti è stata determinata nello studio dei pannelli internazionali di sieroconversione Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), cat. nr. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 932, PRB 940.

Il kit di reagenti rileva gli anticorpi dell'HIV-1 nei sieri di un pannello standard contenente gli anticorpi dell'HIV-1 ("Standard AT (+) HIV-1", N. FSR 2007/00953 del 25.10.2007), rileva gli anticorpi dell'HIV -2 nei sieri di un pannello standard contenente anticorpi anti HIV-2 ("Standard AT (+) HIV-2", n. FSR 2007/00953 del 25.10.2007). Sensibilità - 100%.

Certificato di registrazione n. FSR 2010/07958 del 13 luglio 2011 (validità illimitata)

Composizione:

• Immunosorbente. Strisce da una membrana di nitrocellulosa bianca con singole proteine ​​HIV-1 (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) adsorbite su di esse mediante il metodo di trasferimento elettronico e applicate alla striscia con un peptide sintetico HIV-2, un analogo della proteina gp36 e IgG anti-umane (controllo interno) - 18 pezzi;
• K- - siero di controllo negativo. Il siero del sangue umano, che non contiene anticorpi contro HIV-1,2, HCV, antigene HIV, HBsAg, viene inattivato mediante riscaldamento a 560C; liquido chiaro giallo chiaro - 1 tubo (0,08 ml). Contiene conservanti: timerosal e sodio azide;
• K + - siero positivo di controllo. Siero di sangue umano contenente anticorpi anti HIV-1,2 (titolo almeno 1: 10000), privo di HBsAg, antigene HIV, anticorpi anti HCV, inattivato mediante riscaldamento a 560C; liquido limpido giallo chiaro - 1 tubo (0,08 ml) Contiene conservanti: thimerosal e sodio azide;
• K + sl - siero di controllo debolmente positivo. Siero di sangue umano contenente anticorpi anti HIV-1,2 (titolo non superiore a 1: 200), privo di HBsAg, antigene HIV, anticorpi anti HCV, inattivato mediante riscaldamento a 560C; liquido chiaro giallo chiaro - 1 tubo (0,08 ml). Contiene conservanti: timerosal e sodio azide;
• RROKk (x10) - soluzione di diluizione per campioni e coniugato. Concentrato - Tampone Tris contenente siero di capra normale pretrattato; liquido grigio opaco - 1 flacone (10 ml). Contiene un conservante: timerosal;
• PRk (x20) - soluzione di lavaggio. Concentrato - Tampone Tris contenente Tween-20; liquido trasparente incolore - 1 flacone (70 ml). Contiene un conservante: timerosal;
• Coniugare. Anticorpi di capra anti-IgG umane coniugati a fosfatasi alcalina; liquido limpido e incolore - 1 tubo (0,06 ml);
• Substrato (soluzione colorante). Una soluzione di 5-bromo-4-fluoro-indolil fosfato (BCIP) e nitro blu tetrazolio (NBT); liquido chiaro giallo chiaro - 1 flacone (50 ml);
• Polvere per immunoblotting. Latte scremato in polvere - polvere amorfa bianca o giallo chiaro - confezione da 5 x 1g;
• Un piatto con un coperchio per impostare una reazione - 2 pezzi;
• Pinzette di plastica - 1 pezzo.