Buvard immunitaire. Méthodes modernes pour le diagnostic de l'infection par le VIH. Étude pendant la grossesse

Qu'est-ce que l'immunotransfert ? Il s'agit d'une méthode courante de diagnostic en laboratoire. infections virales personne. Il est considéré comme l'un des moyens les plus précis et les plus fiables de détecter la présence du VIH. En termes de fiabilité, il surpasse même les résultats de l'immunoblot qui sont considérés comme irréfutables et définitifs.

informations générales

Immunoblot - qu'est-ce que c'est ? Afin de reconnaître l'infection par le VIH chez une personne, il est nécessaire de subir un test de laboratoire du sérum sanguin pour la présence d'anticorps. La technique du Western blot est également appelée Western blot. Il est utilisé pour détecter les infections virales humaines en tant que méthode experte supplémentaire. Il est nécessaire de confirmer l'ELISA - un test de laboratoire qui vous permet de déterminer la présence d'anticorps anti-VIH dans le sang. Revérifier par immunoblotting analyse positive ELISA. Il est considéré comme le plus sensible, le plus complexe et le plus coûteux.

But

Qu'est-ce que l'immunotransfert ? Il s'agit d'une technique de test en laboratoire du sérum sanguin pour la présence d'anticorps contre le virus. Au cours de l'étude, le spécialiste sépare au préalable les protéines virales dans le gel et les transfère sur la membrane de nitrocellulose. La procédure d'immunotransfert est destinée à déterminer le VIH à différents stades. Au premier stade, le virus purifié est soumis à une électrophorèse de ses parties constitutives et les antigènes inclus dans sa composition sont séparés par poids moléculaire.

Il se multiplie dans une cellule vivante, y incorporant sa propre information génétique. A ce stade, une personne devient porteuse du virus VIH si elle a été infectée. La spécificité de la maladie est qu'elle peut ne pas se manifester pendant longtemps. Le virus détruit les lymphocytes, donc l'immunité d'une personne diminue et le corps devient incapable de résister aux infections. Si le VIH est traité correctement et à temps, le patient vivra jusqu'à un âge avancé. L'absence de thérapie entraînera inévitablement la mort. A partir du moment de l'infection, mais sans traitement, la durée de vie maximale ne dépasse pas dix ans.

Particularités

L'analyse par immunoblot est une méthode fiable qui vous permet de déterminer la présence d'anticorps dirigés contre des antigènes Le VIH d'abord et le deuxième type. Si une personne est infectée, des anticorps apparaissent dans les deux semaines, ce qui peut être détecté beaucoup plus tard. La particularité du VIH est que le nombre d'anticorps augmente rapidement et reste dans le sang du patient. Même s'ils sont présents, la maladie peut ne pas se manifester avant deux ans ou plus. La méthode ELISA ne détermine pas toujours avec précision la présence de la maladie, par conséquent, la confirmation des résultats par immunoblot et PCR est requise si le dosage immunoenzymatique a montré résultat positif.

Indications pour rendez-vous

C'est quoi cet "immunoblot" qui a déjà été découvert, mais à qui cette étude est-elle assignée ? Un résultat ELISA positif devient la raison de passer les tests pour la méthode d'immunotransfert. Il est nécessaire de passer par un dosage immuno-enzymatique pour les patients qui seront opérés. En outre, une analyse devrait être effectuée pour les femmes qui planifient une grossesse, ainsi que pour toutes les personnes qui mènent une vie sexuelle promiscuité. Attribuez l'immunotransfert aux patients infectés par le VIH si les résultats ELISA sont incertains. Les symptômes alarmants suivants peuvent devenir une raison pour contacter un médecin :

• perte de poids drastique;
• faiblesse, perte de performance;
• une selle perturbée (diarrhée) qui dure trois semaines;
• déshydratation du corps;
• fièvre;
• ganglions lymphatiques hypertrophiés sur le corps;
• développement de candidose, tuberculose, pneumonie, toxoplasmose, exacerbation de l'herpès.

Le patient n'a pas besoin de se préparer avant de donner du sang veineux. La nourriture ne doit pas être prise 8 à 10 heures avant l'étude. Il n'est pas recommandé de boire des boissons alcoolisées et du café un jour avant le don de sang, de faire des exercices physiques intenses, de ressentir de l'anxiété.

Où faire l'analyse ?

Où puis-je me faire tester pour le VIH ? Les études ELISA, immunoblot sont réalisées dans des cliniques privées urbaines, les résultats sont délivrés dans la journée. Des diagnostics urgents sont également possibles. Dans les établissements médicaux publics, les tests ELISA et les immunoblots sont effectués gratuitement, conformément à la législation de la Fédération de Russie. Les femmes enceintes, ainsi que les patients qui vont être hospitalisés ou subir une intervention chirurgicale, subissent des tests obligatoires pour les maladies infectieuses.

Comment se déroule la recherche ?

Comment se déroule l'analyse ELISA ? L'immunoblot positif/négatif confirme ou infirme les résultats du dosage immunoenzymatique. La procédure de recherche est assez simple. Le spécialiste effectue un prélèvement de sang veineux, dans le temps cela ne prend pas plus de cinq minutes. Après le prélèvement, le site d'injection doit être désinfecté et scellé avec un pansement. La clôture est effectuée à jeun, donc après la procédure, il ne fera pas de mal de manger une barre de chocolat noir ou de boire une boisson chaude sucrée.

Afin d'obtenir une référence pour une analyse gratuite dans un établissement médical public, vous devez consulter un médecin généraliste. En général, l'immunoblot ne diffère pas des autres tests sanguins en termes de méthode de prélèvement. La technique de recherche est simple. Si dans sang humain un virus est présent, le corps commence à produire des anticorps pour le détruire. Chaque virus possède son propre ensemble de protéines antigéniques. La détection de ces anticorps est à la base de la technique d'immunotransfert.

Prix

Combien coûte l'analyse ? L'immunoblot pour le VIH n'est pas un test bon marché. En moyenne, un examen de dépistage par des méthodes de dosage immunologique coûte de 500 à 900 roubles. L'immunotransfert est une étude de vérification dont le coût varie de trois à cinq mille roubles. Les méthodes plus complexes sont beaucoup plus coûteuses. Par exemple, vous devrez payer environ 12 000 roubles pour cela.

Interprétation du résultat

Les méthodes les plus courantes pour diagnostiquer l'infection par le VIH sont le dosage immunoenzymatique et l'immunotransfert. Ils sont utilisés pour déterminer les anticorps dirigés contre le virus de l'immunodéficience dans le sérum sanguin. La présence d'une infection est généralement confirmée par deux tests : le dépistage et la confirmation. L'interprétation des résultats de l'étude doit être effectuée par un médecin, il diagnostique et prescrit également un traitement. Si l'immunotransfert est positif, cela signifie qu'un virus est présent dans le corps humain.

Un résultat positif ne devrait pas être une raison pour l'auto-traitement, car chaque patient peut avoir une image différente de la maladie. L'analyse qualitative comprend le dépistage et la vérification. Si aucun virus n'est trouvé chez le patient, le résultat est « négatif ». En cas de détection par dépistage, une étude de vérification complémentaire est réalisée. L'immunoblot est une analyse qui confirme ou infirme le dépistage. Si des taches sombres apparaissent sur la bandelette réactive à certains endroits (localisation des protéines), le diagnostic est posé "VIH". En cas de doute sur les résultats, des tests sont effectués dans les trois mois.

Vous pouvez prévenir l'infection par le virus de l'immunodéficience si vous suivez certaines règles : évitez les rapports sexuels occasionnels, utilisez un préservatif lors des contacts, ne prenez pas de drogues. Si la maladie est détectée chez une femme enceinte, il est important de suivre strictement les recommandations du médecin traitant, n'oubliez pas de vous faire examiner pour la présence du virus.

hypotension mentale, tachycardie, essoufflement, cyanose. Avec une évolution sévère de la maladie, des saignements, des vomissements avec un mélange de sang sont possibles. Le foie et la rate sont hypertrophiés. L'oligurie est notée. La température reste constamment élevée pendant 3 à 10 jours. Dans le sang périphérique - leucocytose neutrophile avec déplacement de la formule vers la gauche. En plus de la description manifestations courantes peste, développer des lésions caractéristiques des formes cliniques individuelles de la maladie.

La forme cutanée est rare (3-5%). Au site de la porte d'entrée de l'infection, une tache apparaît, puis une papule, une vésicule (fliktène), remplie de contenu hémorragique séreux, entourée d'une zone infiltrée avec hyperémie et œdème. Flickena se caractérise par une douleur aiguë. Une fois ouvert, un ulcère se forme avec une croûte sombre au fond. L'ulcère de la peste se caractérise par une longue évolution, guérit lentement, formant une cicatrice. Si cette forme se complique de septicémie, des pustules secondaires et des ulcères se développent. Le développement d'un bubon régional (forme peau-bubonique) est possible.

La forme bubonique survient le plus souvent (environ 80%) et se distingue par la relative bénignité de l'évolution. Dès les premiers jours de la maladie, une vive douleur apparaît dans la région des ganglions lymphatiques régionaux, ce qui rend les mouvements difficiles et oblige le patient à prendre une position forcée. Le bubon primaire, en règle générale, est unique, des bubons multiples sont moins souvent observés. Dans la plupart des cas, l'inguinal et le fémoral sont touchés, un peu moins souvent les axillaires et cervicales Les ganglions lymphatiques... Les tailles de bubo vont de la noix à la pomme de taille moyenne. Caractéristiques vives - douleur aiguë, consistance dense, adhérence aux tissus sous-jacents, contours lisses dus au développement de la périadénite. Bubo commence à se former le deuxième jour de la maladie. Au fur et à mesure qu'il se développe, la peau au-dessus devient rouge, brille et a souvent une teinte cyanosée. Au début c'est dense, puis ça s'adoucit, des fluctuations apparaissent, les contours deviennent indistincts. Le 10-12ème jour de maladie, il est ouvert - une fistule, une ulcération se forme. Avec une évolution bénigne de la maladie et une antibiothérapie moderne, on observe sa résorption ou son durcissement. En raison de la dérive hématogène de l'agent pathogène, des bubons secondaires peuvent se former, qui apparaissent plus tard et sont de petite taille, moins douloureux et, en règle générale, ne suppurent pas. Une complication redoutable de cette forme peut être le développement d'une forme pulmonaire secondaire ou septique secondaire, qui aggrave fortement l'état du patient, y compris la mort.

pulmonaire primaire la forme est rare, en période épidémique dans 5 à 10 % des cas et représente la forme clinique épidémiologiquement et sévère la plus dangereuse de la maladie. Cela commence brusquement, violemment. Dans le contexte d'un syndrome d'intoxication prononcé dès les premiers jours, une toux sèche, un essoufflement sévère, des douleurs coupantes dans la poitrine apparaissent. La toux devient alors productive, avec la production de mucosités, dont la quantité peut varier de quelques crachats à des quantités énormes, elle est rarement absente. Les crachats, d'abord mousseux, vitreux, transparents, prennent ensuite un aspect sanglant, deviennent ensuite purement sanglants, contiennent un grand nombre de bactéries de la peste. Il est généralement d'une consistance liquide - l'un des signes diagnostiques... Les données physiques sont rares : un léger raccourcissement du son de percussion sur le lobe atteint, à l'auscultation il n'y a pas de râles fins bouillonnants abondants, ce qui ne correspond manifestement pas à l'état général grave du patient. La période terminale est caractérisée par une augmentation de l'essoufflement, de la cyanose, du développement de la stupeur, de l'œdème pulmonaire et du SCT. La pression artérielle chute, le pouls s'accélère et devient filiforme, les bruits cardiaques sont étouffés, l'hyperthermie est remplacée par l'hypothermie. En l'absence de traitement, la maladie se termine par la mort en 2 à 6 jours. Avec l'utilisation précoce d'antibiotiques, l'évolution de la maladie est bénigne, peu différente

IMMUNOBLOT(western blot) - une méthode de test en laboratoire du sérum sanguin pour la présence d'anticorps anti-VIH; il est plus précis que ELISA et est utilisé pour confirmer les résultats ELISA. ELISA - dosage immuno-enzymatique (ELISA) -la recherche en laboratoire permettant de déterminer la présence d'anticorps anti-VIH dans le sang ; Test d'anticorps VIH.

Selon la recommandation de l'OMS, le Western blot est utilisé dans le diagnostic de l'infection par le VIH comme méthode experte supplémentaire qui doit confirmer les résultats ELISA. Habituellement, cette méthode est utilisée pour vérifier un résultat positif avec ELISA, car elle est considérée comme plus sensible et spécifique, bien que plus compliquée et coûteuse.

L'immuno-blot combine un test ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) avec une séparation électrophorétique préliminaire des protéines virales dans un gel et leur transfert sur une membrane de nitrocellulose. La procédure d'immunotransfert se compose de plusieurs étapes (). Tout d'abord, le VIH, préalablement purifié et dégradé en ses composants constitutifs, subit une électrophorèse, tandis que tous les antigènes qui composent le virus sont séparés par poids moléculaire. Les antigènes sont ensuite transférés du gel sur une bande filtrante en nitrocellulose ou en nylon, qui contient désormais un spectre de protéines du VIH invisible à l'œil. Ensuite, le matériel de test est appliqué sur la bandelette (sérum, plasma sanguin du patient, etc.) et s'il y a des anticorps spécifiques dans l'échantillon, ils se lient aux bandelettes de protéines antigéniques qui leur correspondent strictement. À la suite de manipulations ultérieures (comme ELISA), le résultat de cette interaction est visualisé - il devient visible. La présence de bandes dans certaines parties de la bandelette confirme la présence d'anticorps dirigés contre des antigènes VIH strictement définis dans le sérum étudié.

Le transfert immunitaire est le plus souvent utilisé pour confirmer le diagnostic d'infection par le VIH. L'OMS considère les sérums positifs dans lesquels des anticorps dirigés contre deux protéines d'enveloppe du VIH sont détectés par immunoblot. Selon ces recommandations, s'il y a une réaction avec une seule des protéines d'enveloppe (gp160, gp120, gp41) en association ou sans réaction avec d'autres protéines, le résultat est considéré comme douteux et il est recommandé de retester en utilisant un kit d'un autre série ou une autre société. Si même après cela le résultat reste douteux, la recherche est poursuivie tous les 3 mois.

Pour réaliser l'immunoblot au premier stade, les protéines contenues dans le sérum sanguin sont séparées dans le gel selon leur poids moléculaire et leur charge à l'aide d'un champ électrique (par la méthode d'électrophorèse sur gel). Ensuite, une membrane de nitrocellulose ou de nylon est appliquée sur le gel et « éponger » (c'est le buvardage). Ceci est effectué dans une chambre spéciale, qui permet le transfert complet du matériau du gel à la membrane. En conséquence, le motif de l'arrangement des protéines qui se trouvait sur le gel est reproduit sur une membrane (blot), qui peut être facilement manipulée davantage. Initialement, la membrane est traitée avec des anticorps contre l'antigène souhaité, et après avoir lavé le matériel non lié, un conjugué marqué radioactivement est ajouté, qui se lie spécifiquement aux anticorps (comme dans ELISA). L'emplacement du complexe conjugué antigène-anticorps-marqué résultant est déterminé par autoradiographie en utilisant un film radiographique. Après sa manifestation, tout devient clair s'il y a des antigènes dans le sang ou non.

L'immunoblot pour le VIH permet de détecter des anticorps dirigés contre des protéines virales placées sur une membrane spéciale en nitrocellulose. Il s'agit d'une étude très précise qui détermine la présence de fractions dans lesquelles se trouvent les principales protéines sous forme de petites bandes.

L'enveloppe du virus VIH-1 contient des glycoprotéines d'un poids moléculaire de 41 cd à 160 cd (kilodalton). Grande valeur pour la tenue buvardage immunitaire possède la glycoprotéine VIH-2 avec un poids moléculaire de 32 kd à 140 kd. Les protéines du noyau du VIH-1 et les enzymes du virus sont représentées par les protéines p17, p24, p55.

L'agent causal du VIH-2 est constitué de protéines désignées par p16, p25, p56. Ils forment sa coquille intérieure. Le génome comprend 6 gènes régulateurs et 3 gènes structurels. Souvent, lors de la division cellulaire, des inexactitudes génétiques surviennent et plusieurs sous-types de l'agent pathogène apparaissent.

Échantillons positifs

Pour éliminer les erreurs lorsque diagnostic de laboratoire Pour l'infection par le VIH, le patient se voit prescrire une étude supplémentaire. Ses résultats sont intégrés comme positifs si des anticorps contre 2 ou 3 protéines du VIH-1 ou du VIH-2 sont détectés.

L'immunoblot confirme tous les bons résultats ELISA. Dans ce cas, des anticorps contre gp120/160, gp41 ou p24 sont détectés, qui sont des unités structurelles des trois principaux gènes du SIDA - gag, pol et env. Chez certains patients avec des résultats ELISA et PCR négatifs, l'immunotransfert montre plusieurs bandes positives. Le médecin prescrit une étude p24 supplémentaire pour poser le bon diagnostic et exclure la phase précoce de l'infection par le VIH.

En cas de doute sur les résultats obtenus, il est proposé au patient de refaire le test dans les 3 mois suivants. Presque tous les cas de VIH sont confirmés à l'aide du système d'immunoempreinte, le dispositif Sanofi. Dans la plupart des cas, les antigènes du VIH, les protéines p25, gp110/120 et gp160 sont détectés, indiquant une infection par le virus. Un test faussement positif est enregistré chez les patients souffrant de maladies du tissu conjonctif avec niveau élevé bilirubine, lors de l'interaction avec divers antigènes viraux.

Résultat négatif

En cas d'absence de lignées positives correspondant aux protéines du virus du SIDA, l'immunoblot est décodé en résultat négatif. L'analyse confirme sans ambiguïté l'absence d'infection par le virus de l'immunodéficience ou indique une « fenêtre sérologique ». Si l'immunotransfert est négatif, la personne n'est pas porteuse du virus du SIDA.

Des échantillons de sérum de patients infectés par le VIH sont prélevés pour l'étude. Ils sont conservés congelés à -20°C. L'analyse est effectuée à l'aide de systèmes de test :

• Antigène;
• Recombinant-VIH ;
• PeptoScreen.

L'enregistrement d'un résultat négatif indique l'absence d'anticorps contre les glycoprotéines d'enveloppe du VIH gp120, gp160, Sp41 dans le sérum.

Souvent, le patient s'intéresse à la question de savoir s'il peut y avoir un test immunoblot négatif pour le VIH chez un patient qui a un partenaire sexuel infecté. Après l'étude, un résultat discutable est souvent obtenu ou des anticorps contre les protéines gp120 et gp160 sont fixés, ce qui indique l'absence totale de données négatives. Parfois, une réponse douteuse est enregistrée chez les patients présentant une infection asymptomatique.

Résultats non interprétables

L'analyse réalisée à l'aide de différents tests de dépistage des anticorps anti-VIH ne correspond parfois pas à des résultats négatifs et ne répond pas aux critères de séropositivité. Il est difficile pour un médecin d'établir la cause d'un résultat douteux.

Certains patients ne sont pas à risque d'infection par le VIH. Le médecin peut se tromper dans l'interprétation des résultats du test si l'infection est causée par un sérotype différent.

Le sérum sanguin du patient doit être examiné au fil du temps. Si non observé pendant 6 mois manifestations cliniques Sida et il n'y a pas de facteurs de risque, le patient n'a pas d'infection.

Des résultats de test discutables sont obtenus chez des patients présentant un faible risque d'infection. Dans certains cas, l'apparition de données peu claires est causée par des complexes immuns et des auto-anticorps contenus dans le sérum sanguin.

Chez certains patients, l'apparition de résultats douteux est causée par le développement de processus pathologiques:

• maladies infectieuses;
• tumeur cancéreuse;
• réaction allergique.

Le patient a des changements dans l'analyse clinique du sang, ils observent une croissance Protéine C-réactive ou une augmentation de l'ESR. Chez les personnes souffrant maladies infectieuses, révèlent souvent une réponse immunitaire discutable au VIH.

Les patients dont les résultats sont incertains ne peuvent pas être donneurs de sang et de matériel biologique.

Méthode linéaire

Le principe de l'immunotransfert comprend :

1. Utilisation de substance virale native au format VIH ou d'antigènes au format Western-Blot.
2. La combinaison de protéines du VIH avec des anticorps individuels détectés dans le sérum sanguin.
3. Le processus d'incubation a lieu avec l'ajout d'anticorps anti-Ig humaines marqués.
4. Décodage des rayures colorées.

L'analyse permet au médecin d'interpréter les résultats de l'étude en temps opportun. Un transfert positif est décodé comme 2ENV +/- GAG + / POL, non défini - 1 ENV +/- GAG + / POL. Un résultat négatif suppose qu'il n'y a pas de stries.

Pour effectuer l'analyse, des immunoblots recombinants et de lysat sont utilisés. L'étude est spécifique et est de 99,5%.

Les patients souhaitent savoir si le résultat de l'analyse peut être décodé comme faux. Les données reçues peuvent être formées à la suite d'une stimulation forces de protection organisme (grossesse, hémodialyse). En cas de suspicion de syndrome rétroviral aigu et de contact avec un patient infecté par le VIH, il est recommandé au patient de faire un don de sérum pour une réaction PCR. Les tests sérologiques sont confirmés en mesurant charge virale dans l'image présentée du matériel biologique.

Diagnostic du VIH chez les nouveau-nés

Analyse du SIDA chez un enfant jeune âge en cas d'établissement d'un contact avec une mère infectée par le VIH. Les tests sérologiques peuvent être positifs dans un délai d'un an et demi. Les anticorps dans le sérum sanguin d'un nouveau-né sont détectés par ELISA, RIF et immunoblot.

Dans les 9 mois suivant la vie d'un enfant, un résultat positif apparaît en raison de la présence d'anticorps maternels dans le sérum sanguin. L'antigène p24 a une spécificité d'environ 65%. Dans certains cas, il n'est pas possible de détecter des anticorps chez un enfant malade s'il est diagnostiqué avec une faible teneur congénitale en globulines dans le sang. Un résultat d'immunotransfert négatif établi ne garantit pas l'absence d'infection.

Les tests se déroulent en plusieurs étapes :

• 1-2 jours après la naissance;
• en 1-2 mois;
• à l'âge de six mois.

Une étude plus approfondie des anticorps est réalisée jusqu'à l'obtention de 2 résultats négatifs d'immunotransfert. Établir un diagnostic de sida chez un enfant né de femme infectée par le VIH, peut-être sur la base de 2 résultats de test PCR positifs. La transmission de l'agent pathogène du VIH au nouveau-né est exclue si la femme n'allaite pas.

Étude pendant la grossesse

La future mère se voit prescrire un blotting immunitaire et linéaire si un résultat positif pour le VIH est obtenu par ELISA. Si le transfert est confirmé, le patient a le SIDA. Dans ce cas, à partir de la 14e semaine de grossesse, un traitement est prescrit pour prévenir l'infection de l'enfant.

Si un spécialiste peut se tromper lors de la réalisation d'un test sérique pendant la grossesse, la patiente demande au médecin traitant. Il est obligé de remettre à une femme enceinte des copies des tests PCR et ELISA pour éliminer les doutes sur leur fiabilité.

Parfois, des problèmes surviennent lors de la réalisation d'un immunoblot, mais si ELISA, blot et PCR sont positifs, le diagnostic d'infection par le VIH est finalement confirmé. La probabilité d'obtenir un test faussement positif pendant la grossesse est élevée. En cas d'ELISA (+) et d'immunotransfert (-), il est proposé à la femme de reprendre le sérum sanguin.

Le résultat de l'étude est indiqué dans la carte d'échange de la femme enceinte. Avec sa valeur positive, il est interdit à une femme de nourrir un enfant après l'accouchement, afin de ne pas infecter le virus du sida. Les conclusions finales sont tirées sur la base d'études de laboratoire, cliniques et épidémiologiques. Ce n'est qu'après avoir été déchiffrés que le patient reçoit un diagnostic d'infection par le VIH.

En contact avec

Caractéristiques distinctives:

• L'ensemble de réactifs "MPBA - Blot - HIV-1, HIV-2" contient des protéines virales de lysat purifié de HIV 1 et un peptide - antigénique déterminé gp36 de HIV-2;
• Fournit la détection des anticorps au VIH-1, VIH-1 groupe O, VIH 2 sur une bande ;
• Procédure simple de préparation et de réalisation d'analyses ;
• Contrôle qualité interne de la réaction *
• Vitesse maximale d'analyse (3 heures);
• Un petit volume de l'échantillon d'essai - 20 ul;
• Ne nécessite pas d'équipement supplémentaire pour la recherche;
• La qualité du kit est garantie par l'utilisation de matériaux de référence russes et internationaux **

* Le contrôle qualité interne est assuré par la présence de :

• bandelettes de contrôle interne, permet de contrôler l'ajout d'un échantillon de sérum ou de plasma ;
• sérum de contrôle négatif (K-);
• sérum de contrôle positif (K+), permettant d'identifier les bandes détectées sur la bandelette ;
• sérum de contrôle faiblement positif (K + cl), qui permet de contrôler la sensibilité de l'ensemble des réactifs.

**Assurance qualité:

Les caractéristiques de l'ensemble de réactifs "MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2" ont été déterminées en testant des échantillons d'un échantillon aléatoire de donneurs, des patients avec un diagnostic Infection au VIH, panels de séroconversion commerciaux, panels standard et échantillons avec des composants « interférant potentiellement avec la détection ».

Le kit de réactifs ne donne pas de faux positifs dans l'étude de sérums de panel standard qui ne contiennent pas d'anticorps anti-VIH 1,2 et VIH-1 ("Standard AT (-) HIV", n° FSR 2007/00953 du 25.10. 2007). La spécificité est de 100 %.

La spécificité diagnostique a été déterminée en examinant un échantillon aléatoire de 200 donneurs provenant de divers centres de transfusion et cliniques avec une absence précédemment confirmée d'infection par le VIH-1, VIH-2. La spécificité dans l'étude d'un échantillon aléatoire de donneurs était de 100 % ;

La spécificité du kit de réactifs a été déterminée en examinant 250 échantillons, y compris des échantillons de sérum ou de plasma obtenus de femmes enceintes, de patients hospitalisés atteints d'hépatite C et E, et d'échantillons contenant des composants « potentiellement interférents ». Lors de l'utilisation de l'ensemble "MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2" pour ces échantillons, aucun résultat faussement positif n'a été trouvé.

La sensibilité diagnostique a été déterminée en utilisant :
- échantillons de plasma du panel VIH-1 de Boston Biomedica, Inc (WWRB 301) provenant de différentes régions contenant différents sous-types de VIH-1 : groupe M (sous-types A, B, C, D, E, F) et groupe O ; la sensibilité du kit de réactifs était de 100 % ;

La sensibilité du kit de réactifs a été déterminée dans l'étude des panels internationaux de séroconversion Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), cat. nr. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 932, PRB 940.

Le kit de réactifs détecte les anticorps anti-VIH-1 dans les sérums d'un panel standard contenant des anticorps anti-VIH-1 ("Standard AT (+) VIH-1", n° FSR 2007/00953 du 25.10.2007), détecte les anticorps anti-VIH -2 dans les sérums d'un panel standard contenant des anticorps anti-VIH-2 ("Standard AT (+) HIV-2", n° FSR 2007/00953 du 25.10.2007). Sensibilité - 100%.

Certificat d'immatriculation n° FSR 2010/07958 du 13 juillet 2011 (durée de validité non limitée)

Composition:

• Immunosorbant. Bandelettes d'une membrane de nitrocellulose blanche avec des protéines individuelles du VIH-1 (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) adsorbées sur celles-ci par la méthode d'électrotransfert et appliquées sur la bandelette avec un peptide synthétique du VIH-2, un analogue de la protéine gp36 et des IgG anti-humaines (contrôle interne) - 18 pcs;
• K- - sérum de contrôle négatif. Le sérum sanguin humain, qui ne contient pas d'anticorps anti-VIH-1,2, VHC, antigène VIH, HBsAg, est inactivé par chauffage à 560°C ; liquide clair jaune clair - 1 tube (0,08 ml). Contient des conservateurs : thimérosal et azoture de sodium ;
• K + - sérum de contrôle positif. Sérum sanguin humain contenant des anticorps anti-VIH-1,2 (titre au moins 1 : 10000), exempt d'AgHBs, d'antigène VIH, d'anticorps anti-HCV, inactivé par chauffage à 560C ; liquide clair jaune clair - 1 tube (0,08 ml) Contient des conservateurs : thimérosal et azoture de sodium ;
• K + sl - sérum témoin faiblement positif. Sérum sanguin humain contenant des anticorps contre le VIH-1,2 (titre ne dépassant pas 1: 200), exempt d'HBsAg, d'antigène VIH, d'anticorps contre le VHC, inactivé par chauffage à 560C ; liquide clair jaune clair - 1 tube (0,08 ml). Contient des conservateurs : thimérosal et azoture de sodium ;
• RROKk (x10) - solution de dilution pour échantillons et conjugué. Concentré - Tampon Tris contenant du sérum de chèvre normal prétraité ; liquide gris opaque - 1 flacon (10 ml). Contient un conservateur : thimérosal ;
• PRk (x20) - solution de lavage. Concentré - Tampon Tris contenant du Tween-20 ; liquide transparent incolore - 1 flacon (70 ml). Contient un conservateur : thimérosal ;
• Conjuguer. Anticorps IgG de chèvre anti-humains conjugués à la phosphatase alcaline ; liquide clair et incolore - 1 tube (0,06 ml);
• Substrat (solution colorante). Une solution de 5-bromo-4-fluoro-indolyl phosphate (BCIP) et de nitro bleu de tétrazolium (NBT); liquide jaune clair clair - 1 bouteille (50 ml);
• Poudre de buvardage immunitaire. Lait écrémé en poudre - poudre amorphe blanche ou jaune clair - paquet de 5 x 1g;
• Une assiette avec un couvercle pour préparer une réaction - 2 pièces ;
• Pince à épiler en plastique - 1 pièce.